高效凝胶排阻色谱法测定牛血清白蛋白相对分子质量及其分布
于小焱,罗嫣,张晓慧
国家海洋标准计量中心,天津 300112
于小焱,罗嫣,张晓慧
摘要:建立了一种高效凝胶排阻色谱快速测定牛血清白蛋白的相对分子质量及其分布的方法。使用凝胶色谱仪,TSKgel G3000SWXL 型(300 mm×7.8 mm)高效凝胶排阻色谱柱,以 0.05 mol/L 磷酸盐缓冲溶液(pH 6.8)-0.3 mol/L 氯化钠溶液为流动相,流速为 1 mL/min,DAD 检测器,检测波长为 220 nm,选择 300~330 nm 作为参比波长,信号采集时间为 15 min。测得质控样牛血清白蛋白相对分子质量标准物质峰值相对分子质量的均值为 7.160×104 Da,与参考值的相对误差为 7.76%,组间相对标准偏差为 0.49%。采用该法对市售牛血清白蛋白样品的相对分子质量分布进行测试,组内相对标准偏差为 0.004%~0.014%,组间相对标准偏差为 1.89%。该法可以满足一般实验室对牛血清白蛋白样品的分子量分布测定的要求。
关键词:高效凝胶排阻色谱;牛血清白蛋白;超滤膜;相对分子质量;相对分子质量分布
基金:海洋公益性行业科研专项(201105025)
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